杜冠华关于复方“小续命汤”的研究思路

一、复方小续命汤的组成

中药复方“小续命汤”首载于唐代孙思邈《千金要方》，是中医常用治疗中风的有效方剂，由12味中药组成：麻黄3g、桂枝3g、川芎3g、红参3g、甘草3g、附子3g、芍药9g、杏仁9g、生姜9g、黄芩6g、防己6g、防风6g。

二、文献查询（杜冠华）

1、 中文文献：

(1) GC法分析复方小续命汤石油醚提取物的成分

(2) 多成分多靶点是对中药作用机制的表面认识

(3)复方小续命汤抗AD有效成分组研究

(4) 复方小续命汤有效成分组对试验性衰老大鼠的作用

(5) 高效液相色谱-质谱法鉴定中药复方小续命汤有效成分组中醇溶性成分

(6) 升麻苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷在大鼠体内药动学研究及复方给药的影响

(7) 小续命汤有效成分组的高通量筛选研究

(8) 中药复方小续命汤抗AD有效成分组研究

(9) 中药复方小续命汤抗阿尔茨海默病有效成分组中6种有效成分的同时测定

(10) 中药复方研究的策略与药代动力学研究

(11) GC和GC_MS法对小续命汤石油醚总提取物成分及有效成分的快速鉴定

(12) 小续命汤有效成分组中防己诺林碱和粉防己碱在大鼠体内药动学研究

(13) 中药复方小续命汤组分活性评价及抗脑缺血有效成分组制备

2、外文文献

Identification of active compounds and their metabolites by high-performance liquid chromatography/electrospray ionization Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry from Xiao-xu-ming decoction (XXMD)

3、 相关概念：

（1） 高通量药物筛选方法(High throughput screening，HTS)：改变传统的新药筛选过程，

首先采用体外方法寻找对特定靶点具有生物活性的化合物，然后再根据生物学信息及相应的研究步骤，开发全新的药物。它以高效、快速、大规模为主要特点，在筛选药物活性方面表现出极大的优势。中药复方成分复杂，难以建立质量控制标准，阻碍了该方剂的进一步推广。应用高通量药物筛选技术研究中药复方，可以克服复方研究中的主要技术障碍，使中药复方研究进入自动化和规模化。

（2） 复方的有效成分组(group of effective compounds，GEC)是指中药复方中所有与该复

方临床应用目的密切相关的药理活性成分。为研究中药复方的组方科学性和合理性，探讨中药复方基本作用机理，获得高效复方成分提供理论基础。

（3） 阿尔茨海默病（AD）：是一种慢性中枢神经系统退行性疾病，神经系统某些部位受

到一定的损伤。

三、杜冠华关于复方小续命汤的研究思路

中药复方(方剂)是中医药治疗疾病的最基本的形式，采用高通量药物筛选技术的特点，建立评价中药复方有效成分的方法，证明中药复方中的成分可以分为有效成分，有毒成分和无关成分．中药复方中的有效成分是中药复方发挥治疗作用的基础，即不是简单的活性部位，也不是无序的有效部位群，而是能够体现中医药组方理论的有效成分的有机组合，是一个完整的有效成分组合，称为有效成分组（GEC）．中药复方的代谢问题，实际上是有效成分的代谢，但是，这种代谢又不同于简单的化合物代谢，在有效成组中，有效成分的代谢现实了更符合·临床要求的特点．杜冠华以传统经典方“小续命汤”为研究对象，通过对全成分多

活性的综合评价，并以整体动物实验进行药效的验证，形成能够充分反应原方疗效的有效成分组，进行了初步的药物代谢研究，证明中药组方理论不仅对药效有显著的影响，而且对药物代谢也产生了影响，体现了中药组方的合理性．

四、杜冠华有关复方小续命汤所做的实验内容：

1、 成分分析：用GC-MS/MS来分析小续命汤石油醚的提取物的成分及质量控制。

2、 先提取复方小续命汤，得到石油醚提取物或乙醇提取物，将上述提取物通过柱层析

的方法进行分离，共获得240份连续组分样品（L1-L120，A1-A120），,以阿尔茨海默病发病机制或脑缺血的发病机制建立各种模型，采用高通量药物筛选技术对连续样品进行多靶点筛选；通过综合分析多模型筛选结果，找出共同的高活性组分，重新组合得到中药复方“小续命汤”抗AD或抗脑缺血的有效成分组(GEC)

（1） 阿尔茨海默病发病机制：AD主要临床症状为进行性认知功能障碍，患者脑内特

征性病变主要为老年斑、神经纤维缠结、神经元丢失等。老年斑的核心成分主

要是β一淀粉样蛋白(β—amyloid peptide，Aβ)，β一分泌酶是启动Aβ生成的关键

限速酶，抑制β一分泌酶的活性可以有效减少AB的生成。Aβ引起神经毒的主要

作用机制是钙稳态的破坏、活性氧产生、神经细胞对各种伤害性刺激的反应增

强或放大及神经细胞的凋亡。根据这些理论，本实验建立了模拟AD的特征性病

变的细胞模型(β一淀粉样蛋白损伤、过氧化氢损伤、谷氨酸损伤作用及β-分泌

酶抑制剂模型)用以研究复方成分作用，寻找防治AD药物作用的靶点。（复方小

续命汤抗AD有效成分组研究）

（2） 根据脑缺血机制，建立了模型（自由基清除、H2O2损伤、谷氨酸损伤、低氧损

伤、线粒体脂质过氧化模型）用以研究复方成分作用，寻找防治脑缺血药物作

用的靶点。（小续命汤有效成分组的高通量筛选研究）

3、 将之前筛选研究出的复方小续命汤有效成分组，接下来做药理实验或体内药代动力

学实验、成分分析。

五、注意点

1、其中的提取部分：

注：（1）第一种提取方式：石油醚提取和醇提做了体外活性研究，具有生物活性，故实验研究目标主要集中于石油醚提取物或乙醇提取物；

（2）另外一种提取方法，通过活性分析后，确定了40%乙醇提取物和中间层按比例混合为小续命汤抗脑缺血有效成分组，并进行了体外活性评价比较。

2、小续命汤方有效成分组药理活性评价模型如下表所列：